Диагностика и лечение инфекционных болезней собак реферат

Опубликовано: 14.05.2022

Инфекционные болезни животных

Рассмотрение болезней сельскохозяйственных животных, вызываемых бактериями, риккетсиями, хламидиями, микроплазмами, вирусами. Характеристика прионов и прионных инфекций, а также болезней, вызываемых грибами. Болезни рыб, птиц, пчел и их профилактика.

Подобные документы

Внутренние болезни сельскохозяйственных животных. Вскрытие и патоморфологическая диагностика болезней теленка. Общие морфологические признаки бронхопневмоний. Стадии гиперемии и гепатизации. Ведение протокола патологоанатомического вскрытия трупа.

контрольная работа, добавлен 12.11.2017

Диагностика грибковых болезней. Соблюдение ветеринарно-санитарных правил на фермах, создание хороших условий содержания животных, обеспечение их полноценными кормами. Патологоанатомическая диагностика инфекционных болезней сельскохозяйственных животных.

статья, добавлен 14.03.2019

Меры личной профилактики при работе с заразным материалом и при проведении противоэпизоотических мероприятий. Иммунологические методы диагностики инфекционных болезней. Правила транспортировки и оценки пригодности биопрепаратов для использования.

методичка, добавлен 18.12.2012

Этиологическая роль вирусных респираторных инфекций в возникновении, развитии, распространении бронхопневмоний молодняка сельскохозяйственных животных. Серотерапия, гемотерапия и лизатотерапия. Экономичный и эффективный методы группового лечения животных.

реферат, добавлен 03.01.2020

Продуктивность сельскохозяйственных животных. Классификация инфекционных болезней, методы их диагностики. Описание инфекционных заболеваний, отрицательно влияющие на продуктивность животных и птиц и качество продукции. Профилактика и меры борьбы с ними.

реферат, добавлен 14.11.2013

Организация профилактики незаразных болезней в скотоводстве. Перспективные технологии содержания скота. Контроль за состоянием здоровья животных. Классификация болезней дыхательной системы. Риниты (диагностика, лечение). Диспепсия новорожденных (простая).

контрольная работа, добавлен 24.10.2012

Причины, последствия и особенности развития внутренних незаразных болезней животных. Виды и этапы диспансеризации животных. Характер действия профилактических мероприятий и правила клинических исследований на фермах и комплексах крупного рогатого скота.

доклад, добавлен 17.04.2012

Причины возникновения внутренних болезней у животных. Особенности снижения уровня общей естественной резистентности организма животных. Проведение профилактических мероприятий в современном животноводстве. Санитарное состояние мест размещения животных.

презентация, добавлен 19.06.2018

Внутренние болезни сельскохозяйственных животных. Обеспечение микроклимата и соблюдение зоогигиенических и санитарно-ветеринарных правил. Охранно-ограничительные меры по перевозке и перемещению животных, регулярная очистка и дезинфекция помещений.

реферат, добавлен 23.11.2015

Общая характеристика инвазионных (паразитарных) болезней медоносной пчелы. Характеристика биологии клеща Varraoa — возбудителя болезни. Эпизоотологические данные, патогенез, клинические признаки, диагноз, лечение, меры борьбы, профилактика заболеваний.

Диагностика и лечение инфекционных болезней собак реферат

1. Методы диагностики инфекционных болезней животных

К инфекционным относят заболевания, возбудителями которых являются паразиты растительного происхождения (бактерии, бациллы, фильтрующиеся вирусы).

Для правильного определения болезни нередко требуется провести целую систему диагностических исследований (прижизненных и посмертных).

Прижизненный метод включает в себя эпизоотологическое обследование хозяйства, клиническое обследование больного животного, а также лабораторное исследование материала, полученного от больного животного.

Эпизоотологическое обследование основывается на тщательном анализе эпизоотологической обстановки хозяйства или района. При этом учитывают статистические и отчетные данные, характеризующие ветеринарное состояние хозяйства за предыдущие годы, проводят обследование санитарного и зоогигиенического состояния хозяйства и животноводческих ферм с учетом условий содержания животных, качество ухода за ними, кормления, происхождения кормов, их качества и режима использования, качества воды и порядка водопоя. Определяют количество больных и восприимчивых к заболеванию животных. Устанавливают возможные источники и пути распространения инфекции в хозяйстве и разрешают ряд других вопросов.

К клиническому обследованию больных животных относят все то, что делается на самом животном: измерение температуры, определение состояния пульса и дыхания, а также и другие объективные показатели, не наблюдавшиеся у здоровых животных. Кроме того, проводят исследование крови и аллергические реакции (туберкулинизация, маллеинизация и др.).

В лаборатории присылаемый из хозяйства материал исследуют бактериологическим, серологическим и биологическим методами.

Посмертные методы диагностики осуществляются путем паталогоанатомического вскрытия трупа, а также гистологического, бактериологического и биологического исследований (посевы из трупного материала на питательные среды и заражение лабораторных животных).

Клиническое исследование больных животных. Клинический метод заключается в распознавании заболевания по комплексу отдельных признаков, наблюдаемых у больного животного. Клинические исследования (осмотр, измерение температуры и др.) проводятся поголовно и носят массовый характер. Результаты этих исследований позволяют судить об эпизоотологической обстановке в хозяйстве, а также служит основанием для выделения групп: явно больных, подозрительных в заболевании, подозрительных а заражении и свободных от всяких подозрений (здоровых животных).

Аллергические реакции основаны на повышенной чувствительности больного к введению в его организм дополнительной дозы чужеродного белка. Такое измененное состояние организма, выражающееся в особой его чувствительности на введение антигена (живого или убитого микроба) при наличии живого очага инфекции в теле или перенесенного заболевания, называется аллергией, а реакции, применяемые в целях диагностики некоторых заразных болезней - аллергическими. Явление аллергии в ветеринарии используется для прижизненной диагностики на туберкулез (туберкулинизация), сап (маллеинизация) и бруцеллез (бруцеллинизация).

2. Клинический метод диагностики инфекционных болезней животных

К клиническим методам диагностики инфекционных болезней животных относятся: туберкулинизация, бруцеллинизация и маллеинизация.

Туберкулинизацией определяют скрытые формы туберкулеза у крупного и мелкого рогатого скота, свиней и кур. Для этого используют биологический препарат - туберкулин (убитую культуру туберкулезных бацилл).

Готовят его путем выращивания туберкулезных микробов на мясном бульоне с добавлением глицерина. Бульон, содержащий громадное количество туберкулезных бацилл, выпаривают до 1/10 объема, стерилизуют при температуре 100 0 , фильтруют и разливают в специальные ампулы. Полученный таким образом препарат представляет собой прозрачную, слегка коричневую жидкость.

Качество туберкулина проверяют на здоровых и туберкулезных животных.

Существует три метода туберкулинизации: глазной, внутрикожный и подкожный. Однако подкожный метод применяется в исключительных случаях, так как требует больших затрат труда при контроле за ходом реакции.

Глазная проба (офтальмопроба): вводят 3 - 4 капли туберкулина стерильной пипеткой в конъюнктивальный мешок под нижнее веко здорового глаза.

У животных, больных туберкулезом, спустя 3 - 6 часов наблюдается конъюнктивит с обильным выделением из глаза слизисто-гнойного экссудата, который, вытекая из внутреннего глаза, подсыхает и образует вид шнура.

Положительная реакция длится до 15 - 20 часов. Если после введения туберкулина наблюдается слабо выраженный конъюнктивит с незначительным выделением слизистого или слизисто-гнойного экссудата, реакция считается сомнительной. В этом случае ее повторяют через 3 - 5 дней (туберкулин вводят в тот же глаз) и результат считают окончательным.

Отсутствие изменений конъюнктивы после введения туберкулина рассматривают как отрицательную реакцию.

За ходом реакции наблюдают через каждые 2 час в течение суток, а последний раз - через 48 часов.

Чтобы не было ошибок в реакции, ее проводят в чистом помещении, избегая загрязнения глаза пылью. Животных следует держать на привязи.

Внутрикожная проба: туберкулин вводят внутрь кожи крупному рогатому скоту в области средней трети шеи или в одну из подхвостных складок, телятам и козам - в область лопатки, свиньям и овцам - в кожу основания уха с наружной стороны, курам - в кожу одной из бородок (вторая служит контролем). При этом следует строго соблюдать правила асептики и антисептики. Кроме того, необходимо придерживаться точности введения иглы в толщу кожи, избегая попадания туберкулина под кожу. Признак правильного инъецирования туберкулина в кожу - образование небольшого бугорка.

Перед введением препарата измеряют толщину кожной складки штангенциркулем, а затем это место выстригают и дезинфицируют. После этого двумя пальцами левой руки захватывают складку кожи и по ее длине вводят туберкулин: взрослым животным - 0,2 - 0,25 мл, молодняку до одного года - 0,15; телятам до 3-х месячного возраста - 0,1; курам - 0,1 мл. реакция проявляется через 48 - 72 часа в виде утолщения кожи на месте инъекции препарата. Если утолщение складки кожи 8 мм и больше с болезненной припухлостью - реакция считается положительной, утолщение на 5 - 6 мм - сомнительной, а меньше - отрицательной. Животным с сомнительной или отрицательной реакцией туберкулин вводят повторно через 72 часа в то же самое место и реакцию читают, спустя 24 - 48 часов после введения препарата. Усиление или ослабление наблюдавшихся признаков указывает на положительную или отрицательную реакцию.

Подкожная проба заключается в введении 1 мл туберкулина под кожу. Препарат вводят с таким расчетом, чтобы через 8 часов после его введения можно было измерить температуру. Измеряют ее через каждые 2 часа до 22 часов, считая с момента введения препарата.

Аллергическое исследование на бруцеллез.

Для этой цели применяют биопрепараты абортин и бруцеллизат.

  • Абортин представляет собой суспензию бруцелл в стерильном физиологическом растворе, убитых кипячением, с содержанием 2-ух миллиардов микробных тел (по оптическому стандарту). Этот препарат используют для аллергической диагностики бруцеллеза у молодняка крупного рогатого скота в возрасте до 1 года в порядке, предусмотренном Инструкцией по борьбе с бруцеллезом сельскохозяйственных животных. Абортин вводят внутрикожно с внутренней стороны одной из подхвостных складок в дозе 0,2 мл. место инъекции дезинфицируют денатурированным спиртом или 2% раствором карболовой кислоты. При правильном введении препарата в кожу образуется бугорок с горошину.

У животных, больных бруцеллезом, реакция может наступить уже в первые сутки после введения, а явно выраженной она становиться через 48 - 72 часа.

При положительной реакции кожная складка по сравнению с контрольной сильно утолщается с уплотнением в центре. Слабо выраженный отек считают за сомнительную реакцию. При отрицательной реакции никаких изменений нет. Всех животных, давших сомнительную реакцию, выделяют в особую группу и через месяц повторно исследуют, но абортин

курсовая работа по болезням мелких животных

курсовая работа по болезням мелких животных - Yahoo Search Results Yahoo Web Search Sign in Mail Go to Mail" data-nosubject="[No Subject]" data-timestamp='short' Help Account Info Yahoo Home Settings Home News Mail Finance Tumblr Weather Sports Messenger Settings Want more to discover? Make Yahoo Your Home Page See breaking news more every time you open your browser Add it now No Thanks Yahoo Search query Web Images Video News Local Answers Shopping Recipes Sports Finance Dictionary More Anytime Past day Past week Past month Anytime Get beautiful photos on every new browser window Download Кафедра болезней мелких животных и птиц Учебно-методическое wwwvsavmby/wp-content/uploads/2013/10/Metodika Курсовая работа ставит своей целью использовать полученные теоретические знания по болезням мелких животных и птиц для формирования практических умений и навыков при постановке Курсовая Работа По Внутренним Незаразным Болезням Животных speedkinoweeblycom/blog/kursovaya-rabota-po-vnutrennim Cached Болезни) по незаразным и инфекционным болезням мелких животных и птиц Курсовая работа (история болезни) оформляется после проведения курации больного животного по ds Внутреннее Выполнение и оформление курсовой работы studfilesnet/preview/5709888/page:2 Cached Выполнение и оформление курсовой работы Курсовая работа ставит своей целью использовать полученные теоретические знания по болезням мелких животных и птиц для формирования практических умений и навыков при Болезни животных - Все для студента wwwtwirpxcom/files/medicine/veterinary/deseases Cached Учебно-методическое пособие написано в соответствии с учебной программой по болезням мелких животных и птиц для высших с-х учебных заведений по специальности «Ветеринарная медицина» Курсовая работа: Кесарево сечение мелких домашних животных wwwbestreferatru/referat-219212html Cached Работа проводилась на Бердской ветеринарной станции по борьбе с болезнями животных Здание ветстанции одноэтажное Республики Беларусь - studfilesnet studfilesnet/preview/5709888 Cached Работа по теме: Курсовая для заочников по болезням мелких животных и птиц Болезни Курсовая работа: Бронхопневмония у телят refetekaru/r-108209html Cached Давыдов ВУ, Евдокимов ПД « Учебник по незаразным болезням для оператора по ветеринарной обработке животных » - М: Колос,1982 Курсовая работа по зоологии «Редкие одомашненные животные» infourokru/sootvetstvie_psihologo-pedagogiche Cached Курсовая работа по зоологии Хотя многие из этих мелких животных обеспечивали человека Паразитология и инвазионные болезни животных ПО ВЫПОЛНЕНИЮ kursaknet/parazitologiya-i-invazionnye-bolezni Cached Курсовая работа по дисциплине «Паразитология и инвазионные болезни животных » выполняется студентами 5-го курса очного и 6-го курса заочного отделений факультета ветеринарной медицины в Методические указания по выполнению курсовых работ по rudocsexdatcom/docs/index-345347html Cached 4 Курсовая работа по итогам научных исследований в СНО 9 5 Курсовая работа , выполняемая по индивидуальному плану 9 Promotional Results For You Free Download | Mozilla Firefox ® Web Browser wwwmozillaorg Download Firefox - the faster, smarter, easier way to browse the web and all of Yahoo 1 2 3 4 5 Next 5,710 results Settings Help Suggestions Privacy (Updated) Terms (Updated) Advertise About ads About this page Powered by Bing™

  • 2017-2018 год 16 АКТ 2 Можно ли было спасти животное
  • терапию диету и Скрыть Чат с компанией Время ответа ≈ 1 мин Курсовая работа (Теория) на тему " Болезни мелких " studentlibcom › kursovaya_rabota_teoriya…melkih… Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Болезни мелких животных - курсовая работа (Теория) по сельскому хозяйству Можно ли было спасти животное
  • часто ложится и быстро встает Читать ещё «Оренбургский государственный аграрный университет» Курсовая работа по внутренним незаразным болезням Тема: Острая тимпания рубца (tympania ruminus acuta) Выполнил Болезнь развивается быстро: животное беспокоится

прекращаются жвачка и отрыжка

то как? 3 Как профилактировать данное заболевание ? Анамнестические и клинические данные Свинокомплекс на 24000 голов РУСП имени ПМ Машерова Скрыть 5 Болезни мелких животных и птиц ggauby › downloads…fwm…по Болезням мелких животных… Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте основных заболеваний мелких животных и птиц КУРСОВАЯ РАБОТА Курсовая работа является составной частью учебного плана и обязательным элементом при усвоении программы по курсу болезней мелких животных и птиц Читать ещё основных заболеваний мелких животных и птиц КУРСОВАЯ РАБОТА Курсовая работа является составной частью учебного плана и обязательным элементом при усвоении программы по курсу болезней мелких животных и птиц Контрольная работа должна быть сдана и зачтена в первую неделю сессии Работа защищается студентом перед комиссией в студенческой группе

  • выполняемая по индивидуальному плану 9 Promotional Results For You Free Download | Mozilla Firefox ® Web Browser wwwmozillaorg Download Firefox - the faster
  • smarter
  • выполняемая по индивидуальному плану 9 Promotional Results For You Free Download | Mozilla Firefox ® Web Browser wwwmozillaorg Download Firefox - the faster

Диагностика инфекционных заболеваний

Диагностика инфекционных заболеваний является одной из самых сложных проблем в клинической медицине. Лабораторные методы исследования при ряде нозологических форм играют ведущую, а в целом ряде клинических ситуаций решающую роль не только в диагностике, но и в определении конечного исхода заболевания.

  • бактериологические;
  • серологические;
  • метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) для обнаружения ДНК или РНК возбудителя инфекционного заболевания в исследуемом материале.

У одних пациентов для диагностики этиологии инфекционно-воспалительного процесса достаточно провести бактериологическое исследование, в других клинических ситуациях решающее значение имеют данные серологических исследований, в третьих, предоставить полезную информацию может только метод ПЦР. Однако наиболее часто в клинической практике врачу-клиницисту необходимо использовать данные различных методов лабораторных исследований.

Бактериологические методы исследования

Бактериологические исследования наиболее часто проводят при подозрении на гнойно-воспалительные заболевания (составляют 40-60% в структуре хирургических заболеваний) с целью их диагностики, изучения этиологической структуры, определения чувствительности возбудителей к антибактериальным препаратам. Результаты бактериологических анализов способствуют выбору наиболее эффективного препарата для антибактериальной терапии, своевременному проведению мероприятий для профилактики внутрибольничных инфекций.

Возбудителями гнойно-воспалительных заболеваний являются истинно-патогенные бактерии, но наиболее часто условно-патогенные микроорганизмы, входящие в состав естественной микрофлоры человека или попадающие в организм извне. Истинно-патогенные бактерии в большинстве случаев способствуют развитию инфекционного заболевания у любого здорового человека. Условно-патогенные микроорганизмы вызывают заболевания преимущественно у людей с нарушенным иммунитетом.

Бактериологические исследования при заболеваниях, вызываемых условно-патогенными микроорганизмами, направлены на выделение всех микроорганизмов, находящихся в патологическом материале, что существенно отличает их от аналогичных исследований при заболеваниях, вызванных истинно патогенными микроорганизмами, когда проводится поиск определенного возбудителя.

Для получения адекватных результатов бактериологического исследования при гнойно-воспалительных заболеваниях особенно важно соблюдать ряд требований при взятии биоматериала для анализа, его транспортировки в лабораторию, проведения исследования и оценки его результатов.

  • микроскопическое исследование мазка (бактериоскопия) из доставленного биоматериала;
  • выращивание культуры микроорганизмов (культивирование);
  • идентификацию бактерий;
  • определение чувствительности к антимикробным препаратам и оценку результатов исследования.

Доставленный в бактериологическую лабораторию биоматериал первоначально подвергается микроскопическому исследованию.

Микроскопическое исследование мазка (бактериоскопия), окрашенного по Граму или другими красителями, проводят при исследовании мокроты, гноя, отделяемого из ран, слизистых оболочек (мазок из цервикального канала, зева, носа, глаза). Результаты микроскопии позволяют ориентировочно судить о характере микрофлоры, ее количественном содержании и соотношении различных видов микроорганизмов в биологическом материале, а также дают предварительную информации об обнаружении этиологически значимого инфекционного агента в данном биоматериале, что позволяет врачу сразу начать лечение (эмпирическое). Иногда микроскопия позволяет выявить микроорганизмы, плохо растущие на питательных средах. На основании данных микроскопии проводят выбор питательных сред для выращивания микробов, обнаруженных в мазке.

Культивирование микроорганизмов. Посев исследуемого биоматериала на питательные среды производят с целью выделения чистых культур микроорганизмов, установления их вида и определения чувствительности к антибактериальным препаратам. Для этих целей используют различные питательные среды, позволяющие выделить наибольшее количество видов микроорганизмов. Оптимальными являются питательные среды, содержащие кровь животного или человека, а также сахарный бульон, среды для анаэробов. Одновременно производят посев на дифференциально-диагностические и селективные (предназначенные для определенного вида микроорганизмов) среды. Посев осуществляют на стерильные чашки Петри, в которые предварительно заливают питательную среду для роста микроорганизмов.

Микроскопия мазков, окрашенных по Граму

1 - стрептококки; 2 - стафилококки; 3 - диплобактерии Фридленда; 4 - пневмококки

Колонии отсевают на плотные, жидкие, полужидкие питательные среды, оптимальные для культивирования определенного вида бактерий.

Выделенные чистые культуры микроорганизмов подвергают дальнейшему изучению в диагностических тестах, основанных на морфологических, ферментативных, биологических свойствах и антигенных особенностях, характеризующих бактерий соответствующего вида или варианта.

Идентификация - это комплекс бактериологических методов изучения бактерий, позволяющий определить вид микроорганизма. В Лаборатории «Ситилаб» идентификация большинства видов бактерий и грибов осуществляется на автоматическом бактериологическом анализаторе с использованием диагностических панелей зарубежного производства: на бланке результата исследования в виде наименования микроорганизма или его рода, например, Streptococcus pneumoniae (пневмококк) или Eschrichia coli (кишечная палочка).

Определение чувствительности к антибактериальным препаратам. Чувствительность к антимикробным препаратам изучают у выделенных чистых культур микроорганизмов, имеющих этиологическое значение для данного заболевания. Поэтому в направлении на бактериологические анализы требуется указать диагноз заболевания у больного. Определение чувствительности бактерий к спектру антибиотиков помогает лечащему врачу правильно выбрать препарат для лечения больного.

В Лаборатории «Ситилаб» определение чувствительности выделенной чистой культуры большинства видов бактерий и грибов осуществляется на автоматическом бактериологическом анализаторе с использованием диагностических панелей зарубежного производства к широкому спектру современных антибактериальных препаратов (от 6 до 32 препаратов, в зависимости от выделенного микроорганизма) с определением минимальной ингибирующей концентрации (МИК). На бланке результатов определения чувствительности к антибактериальным препаратам обозначение R указывает на резистентность, I - умеренную чувствительность, S - чувствительность микроорганизма к данному препарату.

Оценка результатов исследования. Принадлежность условно-патогенных микроорганизмов к естественной микрофлоре организма человека создает ряд трудностей при оценке их этиологической роли в развитии гнойно-воспалительных заболеваний. Условно-патогенные микроорганизмы могут представлять нормальную микрофлору исследуемых жидкостей и тканей или контаминировать их из окружающей среды. Поэтому для правильной оценки результатов бактериологических исследований необходимо знать состав естественной микрофлоры изучаемого образца. В тех случаях, когда исследуемый биоматериал в норме стерилен, как, например, спинномозговая жидкость, экссудаты, все выделенные из него микроорганизмы могут считаться возбудителями заболевания. В тех случаях, когда исследуемый материал имеет собственную микрофлору, как, например, отделяемое влагалища, кал, мокрота, нужно учитывать изменения ее качественного и количественного состава, появление несвойственных ему видов бактерий, количественную обсемененность биоматериала. Так, например, при бактериологическом исследовании мочи степень бактериурии (число бактерий в 1 мл мочи), равная и выше 10 5 , свидетельствует об инфекции мочевых путей. Более низкая степень бактериурии встречается у здоровых людей и является следствием загрязнения мочи естественной микрофлорой мочевых путей.

Установить этиологическую роль условно-патогенной микрофлоры помогают также нарастание количества и повторность выделения бактерий одного вида от больного в процессе заболевания.

Врач-клиницист должен знать, что положительный результат бактериологического исследования в отношении биологического материала, полученного из в норме стерильного очага (кровь, плевральная жидкость, спинномозговая жидкость, пунктат органа или ткани), всегда тревожный результат, требующий немедленных действий по оказанию медицинской помощи.

Серологические методы исследования

В основе всех серологических реакций лежит взаимодействие антигена и антитела. Серологические реакции используются в двух направлениях.

1. Обнаружение с диагностической целью антител в сыворотке крови обследуемого. В этом случае из двух компонентов реакции (антитело, антиген) неизвестным является сыворотка крови, так как постановка реакции проводится с заведомо известными антигенами. Положительный результат реакции свидетельствует о наличии в крови антител, гомологичных применяемому антигену; отрицательный результат указывает на отсутствие таковых. Достоверные результаты получают при исследовании «парных» сывороток крови больного, взятой в начале заболевания (3-7-й день) и через 10-12 дней. В этом случае удается наблюдать динамику нарастания антител. При вирусных инфекциях лишь четырехкратное и большее повышение титра антител во второй сыворотке имеет диагностическое значение.

2. Установление родовой и видовой принадлежности микроба или вируса. В этом случае неизвестным компонентом реакции является антиген. Такое исследование требует постановки реакции с заведомо известными иммунными сыворотками.

Серологические исследования не обладают 100%-й чувствительностью и специфичностью в отношении диагностики инфекционных заболеваний, могут давать перекрестные реакции с антителами, направленными к антигенам других возбудителей. В связи с этим оценивать результаты серологических исследований необходимо с большой осторожностью и учетом клинической картины заболевания. Именно этим обусловлено использование для диагностики одной инфекции множества тестов, а также применение метода Western-blot для подтверждения результатов скрининговых методов.

В последние годы прогресс в области серологических исследований связан с разработкой тест-систем для определения авидности специфических антител к возбудителям различных инфекционных заболеваний.

Авидность - характеристика прочности связи специфических антител с соответствующими антигенами. В ходе иммунного ответа организма на проникновение инфекционного агента стимулированный клон лимфоцитов начинает вырабатывать сначала специфические IgM-антитела, а несколько позже и специфические IgG-антитела. IgG-антитела обладают поначалу низкой авидностью, то есть достаточно слабо связывают антиген.

Затем развитие иммунного процесса постепенно (это могут быть недели или месяцы) идет в сторону синтеза лимфоцитами высокоспецифичных (высокоавидных) IgG-антител, более прочно связывающихся с соответствующими антигенами. На основании этих закономерностей иммунного ответа организма в настоящее время разработаны тест-системы для определения авидности специфических IgG-антител при различных инфекционных заболеваниях.

Высокая авидность специфических IgG-антител позволяет исключить недавнее первичное инфицирование и тем самым с помощью серологических методов установить период инфицирования пациента. В клинической практике наиболее широкое распространение нашло определение авидности антител класса IgG при токсоплазмозе и цитомегаловирусной инфекции, что дает дополнительную информацию, полезную в диагностическом и прогностическом плане при подозрении на эти инфекции, в особенности при беременности или планировании беременности.

Метод полимеразной цепной реакции

Полимеразная цепная реакция (ПЦР), являющаяся одним из методов ДНК-диагностики, позволяет увеличить число копий детектируемого участка генома (ДНК) бактерий или вирусов в миллионы раз с использованием фермента ДНК-полимеразы. Тестируемый специфический для данного генома отрезок нуклеиновой кислоты многократно умножается (амплифицируется), что позволяет его идентифицировать.

Сначала молекула ДНК бактерий или вирусов нагреванием разделяется на 2 цепи, затем в присутствии синтезированных ДНК-праймеров (последовательность нуклеотидов специфична для определяемого генома) происходит связывание их с комплементарными участками ДНК, синтезируется вторая цепь нуклеиновой кислоты вслед за каждым праймером в присутствии термостабильной ДНК-полимеразы. Получается две молекулы ДНК. Процесс многократно повторяется. Для диагностики достаточно одной молекулы ДНК, то есть одной бактерии или вирусной частицы.

Введение в реакцию дополнительного этапа - синтеза ДНК на молекуле РНК при помощи фермента обратной транскриптазы - позволило тестировать РНК-вирусы, например, вирус гепатита С. ПЦР - это трехступенчатый процесс, повторяющийся циклично: денатурация, отжиг праймеров, синтез ДНК (полимеризация). Синтезированное количество ДНК идентифицируют методом иммуноферментного анализа или электрофореза.

В ПЦР может быть использован различный биологический материал - сыворотка или плазма крови, соскоб из уретры, биоптат, плевральная или спинномозговая жидкость и т.д. В первую очередь ЦПР применяют для диагностики инфекционных болезней, таких как вирусные гепатиты В, С, D, цитомегаловирусная инфекция, инфекционные заболевания, передающиеся половым путем (гонорея, хламидийная, микоплазменная, уреаплазменная инфекции), туберкулез, ВИЧ-инфекция и т.д.

Методы лабораторной диагностики инфекционных заболеваний животных

Инфекционные заболевания весьма часто встречаются в ветеринарной практике. Для владельца животного важно вовремя обратить внимание на симптомы недомогания питомца. Для большинства инфекционных заболеваний эти симптомы неспецифичны: угнетение, отказ от корма, повышенная температура тела, рвота, понос; при некоторых заболеваниях встречается хромота и опухание суставов; возможно изменение цвета мочи.

Для ветеринарного врача, к которому приводят заболевшее животное, важно составить список дифференциальных диагнозов и исключить (или подтвердить) их специальными методами диагностики. Однако стоит помнить, что выбор диагностического метода будет зависеть от вида возбудителя, его локализации и стадии заболевания. Методика, применимая для диагностики одной инфекции, совершенно неприемлема для диагностики другой.

В данной статье представлен обзор основных методов диагностики инфекционных заболеваний, которыми располагает современная ветеринарная медицина.

1. Культивирование

Целью данного метода является изоляция возбудителя и получение его чистой культуры на специальной среде в оптимальных условиях. Наряду со световой микроскопией культивирование микроорганизмов является «классическим» методом диагностики. Успешное выделение и культивирование возбудителя из клинического материала позволяет подтвердить этиологию заболевания на ранних сроках до появления специфических антител и идентифицировать возбудитель. Однако у этого метода есть свои, достаточно значимые для клинической практики, ограничения.

Возбудители многих заболеваний, как правило, достаточно требовательны к питательным средам и достаточно сложны для культивирования invitro. Не для всех возбудителей определены условия культивирования. В некоторых случаях используют синтетические или полусинтетические среды – однако при этом рост возбудителей очень медленный (до нескольких месяцев) и всегда присутствует значительный риск грибковой или бактериальной контаминации, несмотря строгое соблюдение асептики. Кроме того, проведение работ по культивированию возможно только в специализированных микробиологических лабораториях. Поэтому в ветеринарии данный метод не нашел широкого применения при диагностике инфекционных заболеваний; работы, связанные с культивированием возбудителей, проводятся, как правило, только в специальных исследовательских институтах с целью их более детального изучения и разработки диагностических тест-систем.

2. Световая микроскопия

1) Микроскопия фиксированных окрашенных препаратов

Является наиболее доступным и потому распространенным методом диагностики инфекционных (особенно трансмиссивных) заболеваний в ветеринарной медицине. Основан на выявлении возбудителя в клиническом материале по характерной морфологии. Однако, несмотря на свою простоту и доступность, у этого метода есть свои недостатки.

Во-первых, у метода световой микроскопии достаточно ограниченная чувствительность. При незначительном количестве возбудителей в материале результат микроскопии может быть отрицательным.

Во-вторых, необходимо тщательное приготовление и окраска мазков для минимизации возможных артефактов.

В-третьих, лаборанту или врачу, интерпретирующему мазок, требуется достаточный опыт и хорошее знание морфологии как клеток тканей, так и возбудителей и умение отличать последних от возможных рефракционных артефактов или преципитатов красителя. И, в-четвертых, точное определение вида возбудителя при использовании только световой микроскопии возможно далеко не всегда. Поэтому световую микроскопию стараются дополнять другими методами диагностики, основанными на обнаружении специфических антител либо генетического материала возбудителя.

2)Темнопольная микроскопия

Вид оптической микроскопии, в которой контраст изображения увеличивают за счет регистрации только света, рассеянного изучаемым образцом. Как правило, используется для обнаружения спирохет - боррелий и лептоспир. Из-за необходимости наличия специального оборудования в рутинной ветеринарной практике применяется редко. Кроме того, с помощью темнопольной микроскопии невозможно определить видовую принадлежность возбудителя и его патогенность.

3. Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это метод ферментативного получения ампликонов (большого количества копий) исследуемых фрагментов ДНК путем повторных циклов репликации и денатурации (разделения цепи ДНК на отдельные нити); при этом происходит копирование только исследуемого участка ДНК (при условии его присутствия в данном образце), поскольку только этот участок соответствует заданным условиям.

Метод ПЦР идеально подходит для обнаружения микроорганизмов, трудно визуализирующихся, медленно растущих или сложных в культивировании. ПЦР является наиболее предпочтительным методом для диагностики заболевания в острый период. Основным лимитирующим фактором при использовании ПЦР является содержание в исследуемой пробе достаточного количества материала (нуклеиновой кислоты возбудителя). Для многих возбудителей известно, что их количество в крови меняется с течением времени; таким образом, в какой-то момент времени ПЦР может показать ложноотрицательный результат у инфицированного пациента. Таким образом, для врача крайне важно знать тропность возбудителя к тканям организма и отправлять на исследование тот материал, в котором вероятность обнаружения возбудителя наиболее высока (например, мочу – при диагностике лептоспироза, плаценту или пунктат семенников при подозрении на бруцеллез, синовиальную жидкость - при исследовании на боррелиоз).

К техническим недостаткам этого метода можно отнести возможность ложноотрицательных результатов из-за присутствия ингибиторов реакции в пробе, а также возможность ложноположительных результатов вследствие контаминации. Кроме того, данный метод не всегда подходит для оценки эффективности лечения, поскольку ПЦР выявляет как живые микроорганизмы, так и их «останки».

4. Серологические методы диагностики

Данные методы основаны на выявлении у животных специфических антител. Заражение инфекционным агентом, если оно происходит впервые, в течение недели вызывает у животного умеренный рост иммуноглобулинов класса М (IgM) и постепенное увеличение иммуноглобулинов класса G (IgG), которое достигает пика через 14 дней. Определение уровня антител у животных с остро начинающимся заболеванием (таким как бабезиоз) дает мало полезной диагностической информации. Для диагностики хронических заболеваний (например, моноцитарного эрлихиоза) измерение уровня антител будет более полезным.

Продукция антител у каждого животного может сильно варьироваться; этот процесс зависит от возраста, иммунного статуса и генетической принадлежности. Лучший способ оценки степени сероконверсии заключается в исследовании парных сывороток, взятых с интервалом в 2-3 недели. Растущий титр антител указывают на недавнюю и, следовательно, клинически значимую инфекцию, особенно если это подтверждается соответствующими клиническими признаками. Альтернативным методом определения недавней инфекции является измерение уровня IgM, однако в ветеринарной практике данный метод практически не используется.

1) Твердофазный иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA)

Принцип метода заключается в том, один их специфических реагентов (антиген) иммобилизуют на твердой фазе. Затем последовательно добавляют другие специфические реагенты, проводя после инкубации каждого из них промывку с целью удаления несвязавшихся компонентов. Один из специфических реагентов, так называемый конъюгат, содержит ферментную метку. Для визуализации результата в конце реакции добавляют хромогеновый субстрат. Через определенный промежуток времени реакцию останавливают и проводят считывание на спектрофотометре.

Для определения титра антител в сыворотке готовят несколько последовательных разведений; титр антител определяется как обратный последнему видимому разведению (к примеру, если последнее разведение было 1:2000, то титр антител составит 2000). Метод твердофазного ИФА является наиболее предпочтительным для определения наличия антител к возбудителям, антигены которых легкодоступны (т.е. это либо легко культивируемые микроорганизмы, либо те, для которых получены рекомбинантные антигены). Кроме того, он может использоваться и для выявления антигенов возбудителя – например при диагностике инвазии Dirofilariaimmitisили вируса лейкемии кошек.

Для использования полноценного твердофазного иммуноферментного анализа необходимо наличие специального лабораторного оборудования. Однако существует экспресс-модификация ИФА (SNAP, IDEXX Laboratories), где антиген/антитела иммобилизированы не на плашке, а на мембранном фильтре. Эти тесты широко используются в клиниках для диагностики трансмиссивных заболеваний (лейшманиоза, дирофиляриоза, анаплазмоза, эрлихиоза и боррелиоза). Однако они не дают возможность зафиксировать рост или снижение титра антител, а также определить их принадлежность к M или G классу.

2) Метод флюоресцирующих антител (МФА, IFA)

В случае, когда культивирование микроорганизма сопряжено с техническими сложностями либо небезопасно, применяют метод иммунофлюоресценции. При этом может быть обнаружен как сам организм в зараженных клетках и тканях пациента (прямой МФА) либо наличие в сыворотке специфичных антител (непрямой МФА). В непрямом МФА зараженные клетки (как правило, культурального происхождения) зафиксированы на предметных стеклах либо планшетках. Сама процедура исследования схожа с таковой в ИФА. Однако в конъюгате вместо фермента здесь используется специальный краситель, дающий при определенной длине волны флюоресцентное свечение, которое можно видеть в специальный микроскоп. Количество антител также определяется по последнему разведению, давшему положительный результат.

Прямой МФА считается менее чувствительным; используется в тех случаях, когда число зараженных клеток невелико (например, для выявления в мазках крови морул Anaplasmaphagocytophilum).

3) Иммуноблот (вестерн-блот)

Представляет собой метод, при котором возможна визуализация взаимодействия антител с каждым антигеном в отдельности. Антигены возбудителя отделяются друг от друга с помощью электрофореза, а затем в виде полос наносятся на специальную мембрану (обычно нитроцеллюлозную). Дальнейшие стадии аналогичны таковым в ИФА. Для детекции результатов обычно используют иммунопероксидазный метод; при этом комплексы антиген-антитело визуализируются как отдельные темные полосы. Таким образом, можно понять, на какие именно антигены возбудителя в организме животного выработались антитела. Наибольшее значение метод иммуноблоттинга имеет при диагностике клещевого боррелиоза (болезни Лайма), поскольку метод ИФА при этом часто дает ложноположительные результаты. Кроме того, этот метод считается «золотым стандартом» при диагностике вирусного иммунодефицита кошек.

4) Иммунохроматография (ИХА, «экспресс-тесты»)

По этому принципу сделано большое количество «быстрых тестов», широко используемых в ветеринарных клиниках. Полученная от животного сыворотка наносится на мембрану, содержащую связанный с молекулами золота антиген. Специфичные антитела в сыворотке связываются с антигеном; образовавшийся в результате комплекс антиген-антитело продвигается с током жидкости по тестовой зоне, пока не достигнет матрикса, который его связывает. Данный комплекс выглядит как розовая полоса в зоне преципитации. Аналогично выглядит положительный контроль. Результат, выдаваемый тестами, как правило, является качественным – то есть нарастание или снижение уровня антител по ним отследить невозможно. Некоторые тесты (например, для диагностики парвовирусного и коронавирусного энтерита, лейкемии кошек, сердечного дирофиляриоза) выявляют наличие в сыворотке соответствующего антигена – в таком случае результат является качественным.

Таким образом, в статье были рассмотрены основные методы, применяемые сегодня для диагностики инфекционных заболеваний животных. Особое внимание хотелось бы уделить тому, что не существует какого-либо универсального метода для диагностики того или иного заболевания. Поэтому от врача при постановке диагноза требуется комплексный подход; необходимо учитывать анамнез, длительность заболевания, клинические признаки и данные общих лабораторных исследований.

Кроме того, необходимо умение правильно интерпретировать результаты – ведь даже обнаружение антител (особенно класса G) к тому или иному возбудителю не говорит о том, что именно этот этиологический агент является причиной нынешнего состояния животного. Только грамотное применение и интерпретация специальных методов исследования (не только при диагностике трансмиссивных заболеваний) в сочетании с клинической картиной дает возможность правильно поставить диагноз и назначить адекватное лечение.

Диагностика инфекционных заболеваний

Диагностика инфекций (infectio – перевод с латинского – заражение). Инфекционные заболевания человека представляют собой группу болезней, вызываемых специфическими болезнетворными возбудителями, которые могут передаваться от зараженного человека здоровому. Нередки и случаи передачи патогенных агентов человеку от носителей инфекций или заболевших животных (зоонозные заболевания). Следует отметить, что большинство зоонозных инфекционных заболеваний не передается от человека к человеку. У человека и животных (домашних и диких плотоядных) насчитывают более 300 общих инфекционных возбудителей, из которых более 80 заболеваний вызываются бактериями, свыше 100 – вирусами, около 20 - грибами, 80 заболеваний связано с заражением гельминтами и около 20 - простейшими.

Известны инфекционные болезни, вызываемые, так называемыми арбовирусами – вирусами, передающимися людям через укусы насекомых, например клещей, комаров, блох и др., которые инфицируются от домашних или диких животных. Самая распространенная известная арбовирусная инфекция – клещевой энцефалит. Вирус геморрагической лихорадки также передается клещами. Как известно, клещи являются переносчиками и бактериальных инфекций, например клещевого боррелиоза (болезнь Лайма) или туляремии, хотя туляремию относят к зоонозным заболеваниям, передающимся человеку при непосредственном контакте с больными животными (грызунами), а также при употреблении зараженных продуктов или воды (алиментарный путь заражения). Таким образом, для каждой инфекции у человека характерен свой возбудитель и определенный путь передачи. Возбудителями инфекций могут быть бактерии, вирусы, риккетсии (микроорганизмы, сочетающие в себе особенности бактерий и вирусов), спирохеты, грибки, протозойные (паразитирующие простейшие, одноклеточные), глисты, которые выводятся из организма больного человека или животного при выдохе, мочеиспускании, дефекации, кашле, рвоте, и когда при определенных условиях этот биологический патологический материал становится источником заражения здорового человека.

Согласно литературным данным в настоящее время известно 1415 возбудителей инфекционных и паразитарных болезней. Наиболее обширную группу составляют болезни, вызываемые бактериями и риккетсиями (538 нозологий). Второе место принадлежит паразитарным болезням - 353 нозологии. Вирусные инфекции составляют 217 нозологий. Постоянно возникают новые или впервые выявленные инфекционные заболевания. Так, начиная, с 1970-х голов ежегодно регистрируется, по крайней мере, одно инфекционное заболевание. За последние годы стали известны более 30 инфекционных заболевании, это и ВИЧ, легионеллез, эпидемический ротавирусный гастроэнтерит и ряд африканских лихорадок (например лихорадка Эбола).

В настоящее время существенную роль в распространении инфекционных болезней играет развитие туризма, а также миграционные процессы.

Классификация инфекционных заболеваний

Что касается классификации основных инфекционных болезней человека, то существуют разные системы группировки инфекционных заболеваний. В нашей стране одной из наиболее распространенных является классификация Л.В. Громашевского, построенная в зависимости от локализации возбудителя в организме и механизме его передачи, таких групп насчитывается 5:

  • кишечные инфекции;
  • инфекции дыхательных путей;
  • кровяные инфекции;
  • инфекции наружных покровов;
  • инфекции с различными механизмами передачи, например передающиеся половым путем, воздушно-капельным путем (один из самых распространенных), фекально-оральный, контактный, трансмиссионный, вертикальный от матери к плоду, от матери к новорожденному в родовом акте, внесенные при операциях, инъекциях и т.п.)

Кроме того в РФ принята также международная более многоступенчатая классификация инфекционных заболеваний:

  • кишечные инфекции;
  • туберкулез;
  • бактериальные зоонозы;
  • другие бактериальные заболевания;
  • полиомиелит и энтеровирусные болезни центрально нервной системы;
  • вирусные заболевания, сопровождающиеся высыпаниями;
  • вирусные заболевания,которые передаются членистоногими;
  • другие вирусные заболевания;
  • риккетсиозы и другие инфекции, передаваемые членистоногими;
  • сифилис и другие венерические инфекции;
  • заболевания. которые вызываются спирохетами;
  • грибковые заболевания (микозы);
  • гельминтозы;
  • другие инфекции и паразитарные заболевания.

Инфекционные заболевания вызывают у пациента значительные изменения в картине крови, при многих инфекционных болезнях изменяется функция различных внутренних органов – печени, сердца, легких, мозга, почек, кишечника, практически все инфекционные заболевания протекают с изменениями широкого спектра биохимических параметров, отражающих различные стороны патогенеза. Установлено также, что, к примеру, вирусы краснухи, герпеса, коксаки, полиомиелита, цитомегаловирус и эховирусы (род энтеровирусов) могут вызывать серьезные нарушения в развитии плода и новорожденного. Кроме того в настоящее время есть основания считать, что некоторые группы вирусов могут быть виновниками возникновения диабета первого типа, к ним относят вирус Коксаки, вирус краснухи, реовирус 3 типа, вирус энцефаломиокардита, вирус эпидемического паротита, цитомегаловирус, вирус гепатита А.

Диагностика инфекций

Диагноз инфекционного заболевания основывается на анамнезе больного, эпидемиологическом анамнезе, включает инструментальные методы обследования и, как правило, диагностика инфекционных заболеваний не обходится без использования комплекса лабораторных методов. Диагностика инфекционного заболевания начинается с базовых лабораторных методов исследования: это – клинический анализ крови. Известно, например, что в клиническом анализе крови лейкоцитоз чаще всего выявляется в результате инфекционного заболевания, что многие вирусные, бактериальные и рикетсиозные болезни приводят к нейтропении (снижение нейтрофилов), а частой причиной лимфоцитоза и/или моноцитоза является инфекционный мононуклеоз.

Такой показатель крови, как скорость оседания эритрорцитотв (СОЭ), не являясь самостоятельным диагностическим показателем в силу своей неспецифичности, является индикатором общего неблагополучия и продолжает активно использоваться в медицинской практике для выявления и мониторирования инфекционных и воспалительных заболеваний различного происхождения.

Общий анализ мочи является лабораторным тестом, который часто используется при исследования инфекционных заболеваний не только почек, но и инфекций другой локализации.

Так некоторые инфекционные заболевания сопровождаются протеинурией нефротического типа (количество белка в моче не менее 3г/л). Например хронические инфекционные заболевания могут стать причиной нефротического синдрома. Развитие протеинурии нефротического типа могут вызвать, например, бактериальный эндокардит, туберкулез, сифилис, лепра, гепатит В и С, мононуклеоз, цитомегаловирусная инфекция, ветряная оспа, малярия, токсоплазмоз, шистосомиаз. Появление в моче бактерий и возникновение воспаления указывает на наличие инфекционного заболевания мочеполовой системы.

Достаточно эффективным при инфекционных заболеваниях является использование комплекса биохимических тестов, поскольку количественные и качественные изменения биохимических показателей в крови происходящие во время болезни, отражают происходящие при заболевании биохимические нарушения и позволяют следить за динамикой патологического процесса и адекватностью лечения.

К таким эффективным биохимическим параметрам, которые исследуются при инфекционных и воспалительных заболеваниях другого происхождения, например, относится – спектр белков сыворотки крови (белки острой фазы), ферменты и некоторые другие биохимические показатели. Использованием специфических лабораторных методов, например, при диагностике причин лихорадки неясного генеза, хронических инфекций выполняют ис.

В практической медицине часто требуется более глубокое лабораторное исследование с следования мазков из горла, посевы крови, мочи и других жидкостей и выделений организма для выявления бактерий, грибков, иногда, при изменениях характера стула, назначают исследования кала на яйца глист.

В настоящее время в лабораторной диагностике для выявления инфекционных возбудителей широко используются следующие специфические лабораторные методы:

  • микроскопические методы, позволяющие идентифицировать инфекционного возбудителя в биологическом патологическом материале с помощью разнообразных типов микроскопов после приготовления окрашенных или нативных мазков. , который заключается в выделении чистой культуры возбудителя из патологического материала, с дальнейшей его идентификацией по морфологическим, культуральным, биохимическим, антигенным, токсикогенным (применяя специфические методы) свойствам и определение его чувствительности к антибиотикам и другим химиотерапевтическим препаратам. Эти исследования часто проводят при подозрении на гнойно-воспалительные заболевания. , в основе которых лежит специфическое взаимодействие антигена и направленных к нему антител. Эти исследования позволяют с диагностической целью определять (качественно и количественно) как антигены так и антитела к ним. Использование в лабораторной практике таких серологических методов как: ИФА(иммунофементный анализ), иммунофлюоресцентный, иммунофлюоресцентныф анализ - позволяет определять в крови больного антитела, относящиеся к различным классам иммуноглобулинов (ИГ А, ИГ М, ИГ Ж). Существование определенной закономерности в динамике выработки специфических антител различных классов при инфекционном заболевании позволяет судить как о стадии так и об интенсивности инфекционного процесса.
  • Молекулярно-биологические методы, к которым относится полимеразная цепная реакция (ПЦР-метод).

В основе ПЦР-диагностики лежит молекулярно-биологический метод амплификации (многократное копирование) малых фрагментов нуклеиновых кислот бактерий, вирусов, хламидий, микоплазменных и др. с помощью фермента ДНК- полимереразы. ПЦР-диагностика позволяет провести прямую идентификацию нуклеиновых кислот(РНК или ДНК), то есть генетического материала, инфекционного агента в различном биологическом материале.

Читайте также: